Skip to content

Polimorficzne markery mikrosatelitarne do diagnozy choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi ad 5

2 miesiące ago

402 words

Wyniki te wskazują, że dwóch pacjentów podejrzewanych o występowanie GVHD po transfuzji miało tę komplikację. Obecność polimorfizmów sekwencji DNA w wielu regionach ludzkiego genomu 22-27 ułatwiła badanie dziedzicznej choroby22-24,28. Pięć powtarzających się loci dinukleotydów lub trinukleotydów, które wybraliśmy do analizy, jest wysoce polimorficzne, każdy z siedmioma lub więcej allelami 17-21. Polimorfizmy badano przez amplifikację PCR regionów zmiennych i elektroforezy produktów na nie poddającym się procesowi dojrzewania żelach akrylamidowych. Większość testów mikrosatelitarnych wykorzystuje radioaktywnie znakowane produkty PCR i denaturujące żele akryloamidowe29-31. Nasza metoda umożliwiła bezpośrednią analizę produktów PCR na żelach barwionych srebrem. Ta technika ma zalety szybkości, czułości i łatwości analizy, ponieważ obejmuje tylko dwa etapy, amplifikację i elektroforezę.
Przebadaliśmy DNA w próbce skóry, aby zidentyfikować polimorfizmy DNA w Pacjent 2, ponieważ nie było próbki krwi przed transfuzją. Wzór DNA skóry podczas GVHD w locus TCFIID był mieszaniną polimorfizmów pacjenta i dawcy, chociaż typ pacjenta był dominujący. Ten rodzaj mieszanego wzoru może zakłócać weryfikację wszczepienia. W związku z tym próbki pobrane z biopsji skóry po transfuzji wydają się źle dopasowane do tej metody diagnostycznej. Wykonaliśmy także analizę mikrosatelitarną na ekstrakcie paznokcia. Otrzymane wzory były identyczne jak w krwi obwodowej (dane nie przedstawione). W przypadku rutynowej diagnostyki klinicznej stosowanie próbek paznokci może być bardziej użyteczne niż próbki skóry lub próbki krwi.
Podsumowując, wykazaliśmy, że analiza polimorfizmów powtórzeń mikrosatelitarnych dinukleotydów lub trinukleotydów może identyfikować DNA dawcy u pacjentów z GVHD po transfuzji. Ponieważ ta metoda jest czuła, łatwa do zastosowania i szybka, powinna być przydatna w diagnostyce GVHD. Może również mieć zastosowanie do dokumentacji przeszczepu szpiku kostnego u biorców przeszczepów allogenicznych szpiku.
Finansowanie i ujawnianie informacji
Jesteśmy wdzięczni dr. K. Tanaka, M. Onishi, R. Nagai, K. Shimizu, M. Handa i T. Katougi za cenne dyskusje oraz próbki skóry i krwi pacjentów.
Author Affiliations
Z Wydziału Medycyny Transfuzyjnej i Immunohematologii (LW, TJ, K. Tokunaga, K. Takahashi, SK) oraz Katedry Biochemii i Żywienia (LW, K. Takai), Wydziału Medycyny Uniwersytetu Tokijskiego, Bunkyo-ku ; i Centralne Centrum Krwi Japońskiego Czerwonego Krzyża, Shibuya (K. Tokunaga, SU, K. Tadokoro) – oba w Tokio w Japonii.
Prośba o przedruk do Wang z Departamentu Badań, Centralnym Centrum Krwi Japońskiego Czerwonego Krzyża, Hiroo 4-1-31, Shibuya-ku, Tokio 150, Japonia.
[patrz też: citidiet, grzegrzółka wikipedia, cmp berensona ]

0 thoughts on “Polimorficzne markery mikrosatelitarne do diagnozy choroby przeszczep przeciwko gospodarzowi ad 5”