Skip to content

Mutacje i przeżycie TP53 w raku płaskonabłonkowym głowy i szyi ad

2 miesiące ago

484 words

Wrażliwa i szybka analiza mutacji, 22 przeciwnie, pozwala na określenie zmiany zasady i jej pozycji w obrębie genu. Krystaliczne analizy strukturalne wpływu mutacji TP53 na wiązanie DNA potwierdzają możliwość zmiennego wpływu mutacji na zachowanie guza.23 Badania różnych typów nowotworów24-26 sugerują, że heterogenność mutantów TP53 prowadzi do podobnie heterogenicznych wyników klinicznych. Nasze badanie, obejmujące Grupę Onkologii Wschodniej Spółdzielni (ECOG) i Grupę Onkologii Promieniowania (RTOG) (nr badania: ECOG E4393 / RTOG 9614), ma na celu określenie klinicznej użyteczności wykrywania molekularnego komórek nowotworowych w guzie marginesy; badania nad tym celem są w toku. Niezależnym, drugim celem tego protokołu jest określenie częstości występowania mutacji TP53 w raku płaskonabłonkowym głowy i szyi oraz szukanie związków pomiędzy statusem TP53 a przeżyciem. Raportujemy wyniki drugiego celu w tym artykule.
Metody
Projekt badania
W latach 1996-2002 do naszego prospektywnego, wieloośrodkowego badania z udziałem 18 instytucji ECOG i RTOG włączono 560 pacjentów z rakiem płaskonabłonkowym głowy i szyi. Protokół został zatwierdzony przez ECOG, RTOG i komisję dochodzeniową każdego z uczestniczących instytucji. Wszyscy pacjenci wyrazili pisemną świadomą zgodę. Pacjenci z nowo zdiagnozowanym lub nawracającym rakiem płaskokomórkowym głowy i szyi byli uprawnieni, jeśli plan leczenia obejmował pierwotne wycięcie chirurgiczne z celem leczniczym. Podczas operacji pobrano próbki guza i marginesu.
Menedżerowie danych ECOG i RTOG gromadzili dane demograficzne i kliniczne dla każdego pacjenta od uczestniczących instytucji w okresie okołooperacyjnym i w zaplanowanych odstępach czasu w okresie obserwacji. Raporty z patologii zostały przesłane do ECOG i RTOG, a wyniki zostały przeanalizowane i zestawione w tabeli. W odstępach 6-miesięcznych przez pierwsze 3 lata, a następnie co roku zgłaszano stan każdego pacjenta, w tym informacje o nawracającym lub drugim pierwotnym raku i następującym po nim leczeniu.
Próbki nowotworowe
Izolacja i przetwarzanie próbek nowotworu i ekstrakcja DNA
Próbki nowotworu szybko zamrożono w temperaturze -80 ° C przed wysłaniem do laboratorium guza głowy i szyi na Uniwersytecie Johnsa Hopkinsa. (Próbki zatopione w parafinie były używane, gdy próbki zamrożonych tkanek były niedostępne). Z każdej próbki guza pierwotnego wycinano serię 5-.m wycinków do barwienia hematoksyliną i eozyną, aby potwierdzić obecność raka płaskonabłonkowego głowy i szyję. Dodatkowe przekroje 12 .m wycinano i trzymano przez noc w 1% dodecylosiarczanie sodu i proteinazie K w temperaturze 48 ° C; DNA następnie zebrano za pomocą ekstrakcji fenol-chloroform i strącanie etanolem. Tylko próbki z co najmniej 70% komórkami nowotworowymi były kandydatami do badań molekularnych. Tkanki z mniej niż 70% komórkami nowotworowymi były mikroukładami, aby wzbogacić zawartość komórek nowotworowych w próbce.
Mutacyjna analiza
Mutacje TP53 badano przesiewowo zgodnie z wieloetapowym procesem przy użyciu testu GeneChip p53 i endonukleazy DNA Surveyor (Transgenomic) i denaturującej wysokosprawnej chromatografii cieczowej (DHPLC)
[hasła pokrewne: kosmedica, junical, dentus toruń ]

0 thoughts on “Mutacje i przeżycie TP53 w raku płaskonabłonkowym głowy i szyi ad”

  1. Lekarze czesto sie wsciekaja, ze ludzie na wlasna reke dokdztalcaja sie w internecie